Урогенитальный хламидиоз микробиология. Хламидии. Пути заражения и диагностика
Существуют три вида, утвержденных международным комитетом: Chlamydia trachomatis. C. psittaci и C. pneumoniae.
C. trachomatis может быть разделена на три биовара:
1. Вызывающий трахому и конъюнктивит с включениями.
2. Вызывающий венерическую лимфогранулему (паховый лимфогрануломатоз).
3. Вызывающий пневмонию у мышей.
Оба биовара, вызывающие заболевания у человека, могут быть подразделены на 17 сероваров. Классическая трахома вызывается сероварами A, Ba, B и C, в то время как конъюнктивит с включениями и генитальныеинфекции - серовары D-K. Венерическую гранулему вызывают, по крайней мере, три серовара (L1, L2, L3).
C. psittaci инфицирует млекопитающих и птиц и хотя имеются и серологические различия и различия в нуклеиновых кислотах, этот вид пока еще не был подразделен. C. pneumomae, самый новый вид, во-видимому, инфицирует только людей и пока проявляет себя серологически однородным.
Морфология . Хламидии – мелкие неподвижные бактерии, размерами 300-350 нм, которые плохо окрашиваются по Граму. Однако, они хорошо выявляются в препаратах, окрашенных по Романовскому-Гимзе или другими методами в виде частиц, представляющих внеклеточную, инфекционную, метаболически инертную форму хламидий, известную как элементарное тельце. Как только микроорганизм инфицирует клетку хозяина, он увеличивается в размере до 800-1000 нм. Эта неинфекционная но метаболически активная частица известна как ретикулярное тельце.
Хламидии могут также обнаруживаться иммунофлюоресцентным методом, когда специфическое антитело, меченое изотиоцианатом флюоресцеина наносится на препараты, приготовленные из клинического материала, например из шейки матки, уретры или из инфицированной культуры клеток. Элементарные тельца выглядят как отдельные ярко-зеленые частицы. С помощью этой методики можно подтвердить хламидийную инфекцию в течение 30 минут после получения материала.
Три вида хламидий можно дифференцировать по:
2. Профилю нуклеиновой кислоты;
3. Наличию плазмид;
4. Экспрессированным антигенам
5. Включениям в клетки хозяина, которые различаются морфологически.
C. trachomatis образует в своих включениях гликогеновый матрикс, который окрашивается йодом в коричневый цвет, что имеет значение в диагностике.
Элементарные тельца C. trachomatis и C. psittaci 300-350 нм в диаметре с очень небольшим периплазматическим пространством. C. pneumoniae отличается тем, что имеет большое периплазматическое пространств, давая элементарные тела грушевидной формы (310 x 400 нм).
Ретикулярные тельца всех трех видов хламидий крупные, округлой формы (800-1000 нм). Поскольку ретикулярные тельца метаболически активны, их внутренняя структура отражает стадию размножения. В начале цикла обнаруживается много рибосом. Позже ДНК организуется в ядра для потомства элементарных телец. Образование гликогена в ретикулярных тельцах C. trachomatis обнаруживается в электронном микроскопе примерно через 18 часов после заражения, и включения заметны примерно через 22 ч. В случае C. psittaci или C. pneumoniae образования гликогена не отмечается.
Между цитоплазматической мембраной и клеточной стенкой не отмечается наличия наличия пептидогликана, как это характерно для грамотрицательных бактерий.
Нуклеиновая кислота. Молекулярная масса нуклеиновой кислоты хламидий составляет порядка 660 x 10 6 . Три вида хламидий могут быть дифференцированына основании гомологии, поскольку внутривидовое соответствие не превышает 10 %. Плазмидная ДНК обнаружена у большинства штаммов C. trachomatis и C. psittaci, но овечьи штаммы C. psittaci и C. pneumomae, по-видимому, не имеют плазмид.
Белок . Полагают, что небольшое число белков имеет значение для понимания антигенности и патогенеза, а также для возможного получения вкацин.
У хламидий имеется четыре белка наружной мембраны, главный из которых имеет видоспецифические эпитопы. У хламидий имеется также белок (heat shock protein), антитела к которому перекрестно реагируют с подобными белками других микроорганизмов, что делает затруднительной интерпретацию серологического ответа при хламидийных инфекциях.
Липополисахариды (ЛПС) . Родо-специфический антиген хламидий может быть получен методами, используемыми для извлечения липополисахаридов из грамотрицательных бактерий. Он имеет три эпитопных участка, из которых только один специфичен для хламидий. Другие эпитопы перекрестно реагируют с мутантами Escherichia coli, Proteus mirabdis и Salmonella typhimunum и с ЛПС, полученным из разных видов Acinetobacter. Поскольку ЛПС-антиген используется в реакции связывания комплемента и некоторых иммуноферментных тестах (ИФА), необходима осторожность при интерпретации результатов.
Культивирование.В 1957 C. trachomatis была выделена путем культивирования в желточном мешке куриного эмбриона. Хотя этот метод теперь не используется широко для выделения хламидий, он применяется для производства антигена, особенно для реакции иммунофлюоресценции. Выделение в культуре клеток было успешно проведено в 1965 г. Для роста хламидий культуры клеток должны быть, чтобы обеспечить продуктивное взаимодействие микроорганизма и клеток-хозяев. Это достигается осаждением микроорганизмов на клетки путем центрифугирования и подавления клеток облучением или добавлением к питательной среде 5-йодо-2’-дезоксиуридина. Окраска по Романовскому-Гимзе выявляет виды хламидий, а для обнаружения содержащих гликоген включений C. trachomatis может быть использован йод. Реакция иммунофлюоресценции с соответствующими антисыворотками позволяет выявить родо- или видо-специфические антигены. Различные виды хламидий имеют незначительно различающиеся требования к условиям культивирования, но C. pneumoniae наиболее трудно культивировать и в куриных эмбрионах, и в культуре клеток.
Цикл развития . Первоначально микроорганизм должен присоединиться к клетке хозяина. Обнаружены специфические прикрепительные белки, что позволяет обсуждать вопрос о возможной роли белковых отростков на поверхности элементарных телец. Не все виды хламидий легко взаимодействуют с клетками хозяина. C. psittaci и хламидии венерической лимфогранулемы присоединяются и покрывают поверхность клетки хозяина, но C. trachomatis и C. pneumoniae вряд ли на это способны. Это зависит частично от отрицательного заряда микроорганизморв и клеток хозяина, котрый приводит к отталкиванию их друг от друга. Для преодоления этого добавляют поликатионы типа ДЭАЭ-декстрана, что увеличивает адсорбцию C. trachomatis, в то время как центрифугирование C. trachomatis или C. pneumoniae с клетками хозяина дает возможность формирования гидрофильных связей и повышает прикрепляемость обоих видов хламидий. Эти взаимодействия, хотя и являются полезными in vitro, вероятно не отражают ситуацию in vivo.
Как только хламидии и клетка хозяина вошли в контакт, микроорганизм поступает в клетку внутри вакуоли. Жизнеспособные хламидии, поступившие в цитоплазму клетки хозяина, подавляют слияние с лизососмами, что позволяет избежать их гибели.
В вакуоле элементарное тельце теряет свое компактное дезоксирибонуклеиновое ядро. Клеточная стенка становится менее твердой из-за нарушения дисульфидных связей; частица увеличивается в размере и становится ретикулярным тельцем. Ретикулярное тельце не имеет цитохрома и неспособно вырабатывать АТФ, снабжение которой должно обеспечиваться хозяином. В вакуоле ретикулярное тельце размножается бинарным делением, в результате чего образуются плеоморфные микроорганизмы. Через 18-20 ч ДНК уплотняется, формируются дисульфидные связи в белках наружной оболочки, и образуются новые элементарные тельца внутри эндосомальных пузырьков Выход элементарных телец идет вследствие лизиса клетки хозяина.
Потребность хламидий в определенных аминокислотах может вести к подавлению размножения, которое может быть восстановлено добавлением необходимых аминокислот.
Иммунитет и патогенез. Хламидийные инфекции вызывают гуморальные и клеточные иммунные реакции, которые играют различную роль в выздоровлении, резистентности к повторному инфицированию и иммунопатологических осложнениях. Хламидийные инфекции у человека не могут в достаточной мере быть изучены экспериментально, так как хотя и были созданы модели на животных, реакции у них могут не вполне соответствовать реакциям у человека. Однако, были использованы две самопроизвольные инфекции, коньюнктивит с включениями у морских свинок и пневмония у мышей. Выздоровление морских свинок замедлялось при подавлении иммунитета в результате введения циклофосфамида или антилимфоцитарной сыворотки. Это указывает на то, что и гуморальный, и клеточный иммунный ответ необходимы для выздоровления от коньюнктивита с включениями у морских свинок.
При инфекциях у человека хламидии обладают способностью к десквамации клеток эпителия, а также макрофагов легких и желудочно-кишечного тракта. Такие инфекции вызывают развитие воспалительной реакции с инфильтрацией нейтрофилами в острой стадии. Внутриклеточное разрушение хламидий нейтрофилами встречается в клетках кислород-зависимыми и кислород-независимыми ферментными системами. Впоследствии в инфильтрате появляются моноциты и лимфоциты. Хламидии не размножаются в моноцитах, но когда эти клетки становятся тканевыми макрофагами, и C. psittaci, и хламидии венерической лимфогранулемы могут высвобождаться из фаголизосом и давать большое количество микроорганизмов. C. trachomatis может также размножаться в макрофагах, но в меньшем объеме. Предполагают, что инфицированные макрофаги могут быть средством распространения хламидий в организме хозяина.
Продукция антител идет в обычной последовательности, вначале IgM, затем - IgG, уровень антител зависит от дозы. Образуется сывороточный IgA, в слизи обнаруживается секреторный IgA (S-IgA). Чем выше уровень S-IgA, тем менее успешно выделение хламидий из полового тракта. Более позднее, на 6-8 неделе, повышение уровня IgM и IgG антител к C. pneumoniae в сравнении с ранним, на 2-3 неделе повышением при генитальной инфекции, необходимо учитывать при серологической диагностике.
Значение секреторных антител (или скорее их недостаточность) хорошо видно у новорожденных, имеющих материнские IgG. У части, инфицированных в родовых путях C. trachomatis, развивается конъюнктивит, несмотря на материнские IgG. Если инфекция не лечится соответствующим образом, у них развивается пневмония в возрасте 4-12 недель, когда уровень материнских антител снижается, и новорожденные начинают образовывать собственные IgM и IgG. Присутствие IgM антител или повышение титров IgG является признаком хламидийной инфекции дыхательного тракта новорожденных.
Хотя специфические антитела могут нейтрализовать хламидии in vitro, существует лишь небольшая защита против повторной инфекции глаз или слизистых половых органов у лиц с циркулирующими IgG антителами. При вторичных или более поздних инфекциях наблюдается очень быстрая инфильтрация нейтрофилами и лимфоцитами. Плазматические клетки образуют антитела, которые не способны привести к выздоровлению. Эта недостаточность защиты антителами имеет значение для попыток разработки эффективной вакцины.
Клеточный ответ. Антитела - не единственный фактор, который нужно рассматривать при повторной инфекции. Клеточно-опосредованный иммунитет также играет роль, которая может быть но может и не быть полезной для организма хозяина.
Цельные живые хламидии, убитые высокой температурой микроорганизмы или даже липополисахарид может стимулировать продукцию лимфокинов типа При трахоме острая инфекция заканчивается воспалительной реакцией с инфильтрацией нейтрофилами и лимфоцитами. Эти лимфоциты могут группироваться и образовывать фолликул. Центр фолликула состоит из B клеток и макрофагов, окруженных T клетками, и все они окружены тонким слоем эпителиальных клеток. Эти эпителиальные клетки слущиваются, поскольку фолликул некротизируется, и регенерация фиброзной ткани, стимулируемая интерлейкином-1, ведет к рубцеванию. При повторной инфекции или повторной стимуляцией хламидийным антигеном воспалительная реакция будет более быстрой, приводящей к формированию большого количества фолликулов и рубцеванию.
То же относится и к половому тракту, где восходящая инфекция может приводить к сальпингиту. Это заканчивается воспалительной реакцией с инфильтрацией нейтрофилами и лимфоцитами, нарушением мерцательного эпителия и эпителиальных клеток вблизи лимфоцитов. Повторяющаяся инфекция вызывает тяжелое поражение труб с формированием фолликулов, значительное разрушение эпителия и рубцевание, ведущее к нарушению проходимости (обструкции) бахромчатого конца труб. Такое поражение может заканчиваться бесплодием из-за нарушения продвижения яйцеклетки и к хронического воспаления тазовых органов.
Патогенные хламидии, особенно С. trachomatis, довольно часто вызывают острые или хронические воспаления уретры, влагалища, шейки матки. Урогенитальный хламидиоз протяжении последнего десятилетия встречается чаще, чем сифилис и гонорея. Основной путь передачи заболевания - половой, реже - бытовой.Материалом для лабораторного исследования служат соскобы со слизистой уретры у мужчин и женщин и соскобы с шейки матки у женщин. Украинских НД1 дерматологии и венерологии разработал унифицированные методы диагностики мочеполовых хламидиозов. Среди них важное значение имеют экспресс-методы, выявление морфологических структур и антигенов хламидий в исследуемом материале, выделение хламидий в культурах клеток, выявление хламидийных антител с помощью серологических реакций и полимеразная цепная реакция.Экспресс-методы
Ряд фирм СЕЛА и Франции разработали специальные диагностические тесты для проведения имунохроматографичных экспресс-методов, которые могут выдать результат через 10-30 мин. Однако их чувствительность и специфичность значительно меньше, чем при проведении полномасштабных исследований.Микроскопические методы
Исследуемый материал берут у больных, которые в течение месяца не должны принимать антибиотики. Соскобы делают одноразовым зондом (щеточкой, ложечкой Фолькмана, жолобкуватим зондом). Инфекционный материал наносят на поверхность 8 мм ямки специального предметного стекла. Мазок высушивают 20-30 мин и фиксируют в холодном ацетоне в течение 5-10 мин, окрашивают по методу Романовского-Гимза 35-40 мин, обрабатывают подкисленным этанолом (3-5 капель ледяной уксусной кислоты на 15-20 мл спирта) в течение 5-10 с, промывают водой, высушивают и микроскопируют. Ретикулярные тельца окрашиваются в сине-фиолетовый цвет, а элементарные тельца - в розово-красный. Зернистые структуры хламидий располагаются вблизи ядра. Выявление 5-10 типичных включений имеет диагностическое значение.Антигены хламидий в инфекционном материале обнаруживают с помощью прямой и непрямой реакции иммунофлюоресценции. Суть прямого метода заключается в соединении меченных флуорохромом антител с хламидийным антигеном и выявлении специфического свечения при люминесцентной микроскопии. Люминесцентная антихламидийну сыворотка производится в Харькове. Есть много иностранных диагностических систем для проведения этого метода.Суть косвенного метода заключается в соединении комплекса антиген + немеченых хламидийные антитела с видовой (антиглобулиновою) меченой флуоресцеин сывороткой.Кроме микроскопических методов, антигены хламидий в инфекционном материале можно обнаружить с помощью иммуноферментного анализа. Принцип метода заключается во взаимодействии моноклональных хламидийных антител, адсорбированных на твердой фазе, с антигеном хламидий, находящегося в исследуемом материале, и образовании иммунных комплексов. Материалом для анализа могут быть соскобы со слизистых оболочек, центрифугат моче, секретах, биоптаты подобное.Уже разработаны и внедрены в практику много диагностических тест-систем для ИФА. Исследуемый материал вносят на адсорбированные в лунках планшеты антитела. Оценка результатов проводится с помощью иммуноферментного анализатора согласно инструкции к каждой тест-системы. Чувствительность ИФА для выявления хламидий колеблется в пределах 50-70% у мужчин и 88-100% у женщин.Выделение хламидий в культурах клеток
Наиболее точным и доказательным методом диагностики хламидиоза является выделение возбудителя на культуре клеток (золотой стандарт). Чаще всего используют культуры клеток L-929, McCoy, Hela, ВНК-21. В стерильные плоскодонные пробирки диаметром 14 мм вносят на дно покрывных стекла, добавляют по 1 мл клеточной суспензии в питательной среде (1-Ю5 клеток / мл) и ставят на 24-48 ч в термостат при 37 ° С для образования монослоя клеток на покрывных стеклах. Затем среду выливают, вносят инфекционный материал, обработанный антибиотиками, центрифугированные течение часа при 3000 об / мин, инкубируют в термостате 2 часа при 37 ° С. Исследуемый материал выливают, заменяют его свежим питательной средой, инкубируют в термостате 48-72 час. Покрывных стекла с монослоем клеток вынимают, фиксируют 10 мин метанолом, промывают фосфатным буфером и окрашивают по методу Романовского-Гимза. Покрывных стекла монтируют на предметном стекле монослоем клеток вниз в канадском бальзаме.Во иммерсионным объективом выявляют наличие цитоплазматических включений. Элементарные тельца хламидий окрашиваются в красный, а ретикулярные тельца - в синий цвет.При обработке препаратов флуоресцентными антителами монослой клеток также монтируют на предметном стекле в глицерине и исследуют с помощью люминесцентного микроскопа. Метод высокоспецифичным (100%) и чувствительный (75%), но достаточно сложный, дорогой, результат получают через 72-96 час. Кроме того, велик риск заражения персонала. Для практических лабораторий он еще малодоступен.Иммунологическая диагностика
В современной практике серологических исследований мочеполовых хламидиозов используют 4 иммунологические реакции: непрямой иммунофлюоресценции, непрямой гемагглютинации, связывания комплемента и метод иммуноферментного анализа. Материалом для исследования во всех 4-х реакциях является сыворотка крови больных, секреты половых желез.С целью выявления хламидийных антител в реакции непрямой иммунофлюоресценции применяют специфический хламидийный антиген, который обеспечивает реакции с антителами ко всем вариантам С. trachomatis.При постановке этой реакции на предметном стекле готовят слайд-антигены. Стекло помещают на трафарет с указанием зон нанесения антигенов (контрольного и специфического). Слайды высушивают 15-20 мин и фиксируют в охлажденном ацетоне. Затем на слайд-антигены наносят соответствующие разведения сыворотки, инкубируют 40 мин при 37 ° С во влажной камере. После этого препарат трижды промывают фосфатным буферным раствором, добавляют антивидовой люминесцирующих сыворотку еще раз выдерживают 40 мин во влажной камере и снова трижды промывают. Высушенные слайды исследуют под люминесцентным микроскопом. Технику постановки реакции выполняют инструкции, прилагаемой к каждой диагностической тест-системы.Оценку результатов проводят по степени специфической флуоресценции комплексов элементарных и ретикулярных телец с антителами, используя классическую чотириплюсову систему. Титром хламидийных антител сыворотки больного считают то больше ее разведения, при котором наблюдается четкое ярко-зеленое свечение не менее, чем на 2 +. При хламидийных поражениях мочеполовой системы он равен 1:64 и выше. Постановка РИФ методом парных сывороток должна выявить нарастание титра антител в 4 раза от исходного уровня.Рекцию непрямой гемагглютинации используют, в основном, для диагностики зоонозных хламиде иозив и первичного серологического скрининга заболеваний у людей.Реакция связывания комплемента позволяет выявить антитела к родоспецифичного антигена хламидий. Ставят ее по обычной схеме. Диагноз считают положительным при титре комплементсвязывающих антител 1:64 и выше. РСК мало подходит для диагностики хламидийных инфекций генитальной системы.Выявление хламидийных антител иммуноферментным методом базируется на взаимодействии антигена с хламидий на поверхности лунок полистирилових планшет с IgM и IgG в сыворотках больных людей. Уже изготовлена большое количество диагностических наборов.Сначала сыворотку больного разводят во вспомогательном ряду пробирок, затем проводят сорбцию антител в лунках микротитровального планшета. Подробная методика постановки ИФА изложена в инструкции, прилагаемой к диагностической тест-системы. ИФА рекомендуют ставить с помощью парных сывороток. Оценку результатов осуществляют с помощью иммуноферментного анализатора по величине оптической плотности растворов в лунках полистирилового планшета.
Название "хламидия" (от греч. chtamys - мантия) отражает наличие оболочки вокруг микробных частиц.
Chlamydia trachomatis и Chlamydia pneumoniae отнесены к безусловно патогенным для человека микроорганизмам и являются возбудителями антропогенных хламидиозов. В зависимости от вида возбудителя и входных ворот (дыхательные пути, мочеполовая система) выделяют респираторные и урогенитальные хламидиозы.
Описано более 20 нозологических форм, вызванных Chlamydia trachomatis, среди них трахома, конъюнктивит, паховый лимфогранулематоз, синдром Рейтера, урогенитальные хламидиозы, вызываемые Chlamydia trachomatis инфекции, по оценкам ВОЗ занимают второе место среди заболеваний, передаваемых половым путем , после трихомонадных инфекции. Ежегодно во всем мире регистрируется около 50 млн заболевших.
Chlamydophila pneumonia вызывает тяжелую пневмонию, заболевание верхних дыхательных путей. Высказываются предположения об участии Chlamydophila pneumonia в развитии атеросклероза и бронхиальной астмы.
Морфологические и тинкториальные свойства хламидий
Хламидии - мелкие грамотрицательные бактерии шаровидной или овоидной формы. Не имеют жгутиков и капсулы. Основным методом выявления хламидий является окраска по Романовскому-Гимзе. Цвет окраски зависит от стадии жизненного цикла: элементарные кольца окашиваются в пурпурный цвет на фоне голубой цитоплазмы клетки, ретикулярные тельца окрашиваются в голубой цвет.
Строение клеточной стенки напоминает таковую грамотрицательных бактерий, хотя имеются отличия. Она не содержит типичною пептидогликана: в его составе полностью отсутствует N-ацетилмурамовая кислота. В состав клеточной стенки входит наружная мембрана, которая включает в себя ЛПС и белки Несмотря на отсутствие пептидогликана, клеточная стенка хламидий обладает ригидностью. Цитоплазма клетки ограничена внутренней цитоплазматической мембраной.
Анализ наружной мембраны (НМ) хламидий показал, что в ее состав входят ЛПС, основной белок наружной мембраны (МОМР). А также богатые цистеином белки Ompl и OmpЗ, связанные с внутренней поверхностью НМ. ЛПС и МОМР Chlamydia psittaci и Chlamydia trachomatis, в отличие ог МОМР Chlamydia pneumoniae, локализуются на наружной поверхности клетки. Здесь же располагаются белки Omp Chlamydia psittaci и Chlamydia pneumoniae с молекулярной массой 90-100 кД.
Хламидий полиморфны, что связано с особенностями их репродукции. Уникальный (двухфазный) цикл развития хламидий характеризуется чередованием двух различных форм существования - инфекционной формы (элементарные тельца - ЭТ) и вегетативной формы (ретикулярные, или инициальные, тельца - РТ).
Микроорганизмы содержат РНК и ДНК. В РТ РНК в 4 раза больше, чем ДНК. В этих содержание эквивалентно.
Ретикулярные тельца могут быть овальной, полулунной формы, в виде биполярных палочек и коккобацилл, размером 300-1000 нм. Ретикулярные тельца не облагают инфекционными свойствами и, подвергаясь делению, обеспечивают репродукцию хламидий.
Элементарные тельца овальной формы, размером 250-500 нм, обладают инфекционными свойствами, способны проникать в чувствительную клетку, где и происходит цикл развития. Они обладают плотной наружной мембраной, что делает их устойчивыми во внеклеточной среде.
Культивирование хламидий
, , , , , , , , , ,
Антигенная структура хламидий
Хламидии имеют антигены трех типов: специфический антиген (общий у всех видов хламидии) - ЛПС; инфоспецифический антиген (различный у всех видов хламидии) - белковой природы, расположенный в наружной мембране; типоспецифический (различный у сероваров Chlamydia trachomatis) - ЛПС, плодящийся в клеточной стенке микроорганизма; вариантоспецифический антиген белковой природы.
Серовары А, В, и С называются глазными, так как они вызывают трахому, серовары D, Е, К, О, Н, I, J, К (гениальные) являются возбудителями урогенитального хламидиоза и его осложнений, серовар L - возбудитель венерических лимфогрануломатозов. Возбудитель респираторного хламидиоза Chlamydia pneumoniae имеет 4 серовара: TWAR, AR, RF, CWL. Chlamydia psittaci имеет 13 сероваров.
, , , , , , , , , ,
Клеточный тропизм хламидий
Chlamydia trachomatis имеет тропизм к слизистой оболочке эпителия урогенитального тракта, причем может оставаться локально на ней или распространяться по всей поверхности ткани. Возбудитель венерической лимфогранулемы имеет тропизм к лимфоидной ткани.
Chlamydia pneumoniae размножается в альвеолярных макрофагах, моноцитах и эндотелиальных клетках сосудов; возможно также системное распространение инфекции.
Chlamydia psittaci вызывают инфекцию в различных типах клеток, включая мононуклеарные фагоциты.
, , , , , ,
Цикл развития хламидий
Цикл развития хламидий продолжается 40-72 часа и включает две различные по морфологическим и биологическим свойствам формы существования.
На первом этапе инфекционного процесса происходит адсорбция элементарных телец хламидий на плазмолемме чувствительной клетки хозяина при участии электростатических сил. Внедрение хламидий в клетку происходит путем эндоцитоза. Участки плазмолеммы с адсорбированными на них ЭТ инвагинируются в цитоплазму с образованием фагоцитарных вакуолей. Этот этап длится 7-10 ч.
Далее в течение 6-8 ч происходит реорганизация инфекционных элементарных телец в метаболически активные неинфекционные, вегетативные, внутриклеточные формы - РТ, которые многократно делятся. Эти внутриклеточные формы, представляющие собой микроколонии, называются хламидийными включениями. В течение 18-24 ч развития они локализованы в цитоплазматическом пузырьке, образованном из мембраны клетки хозяина. Во включении может содержаться от 100 до 500 ретикулярных телец хламидий.
На следующем этапе в течение 36-42 ч происходят созревание (образование промежуточных телец) и трансформация ретикулярных телец путем деления в элементарных тельцах. Разрушая инфицированную клетку. Элементарные тельца выходят из нее. Находящиеся внеклеточно, элементарные тельца через 40-72 часа проникают в новые клетки хозяина, и начинается новый цикл развития хламидий.
Помимо такого репродуктивного цикла, в неблагоприятных условиях реализуются и другие механизмы взаимодействия хламидий с клеткой хозяина. Это деструкция хламидий в фагосомах, L-подобная трансформация и персистенция.
Трансформированные и персистируюшие формы хламидий способны реверсировать в исходные (ретикулярные) формы с последующим преобразованием в элементарные тельца.
Вне клеток хозяина метаболические функции сведены к минимуму.
, , , , , ,
Факторы патогенности хламидий
Адгезивные свойства хламидий обусловлены белками наружной мембраны клеток, которые обладают также антифагоцитарными свойствами. Кроме того, микробные клетки имеют эндотоксины и продуцируют экзотоксины. Эндотоксины представлены ЛПС, во многом аналогичными ЛПС грамотрицательных бактерий. Термолабильность субстанции составляют экзотоксины, они присутствуют у всех и вызывают гибель мышей после внутривенного введения.
У хламидий обнаружено наличие секреторной системы III типа, через которую происходит инъекция хламидийных белков в цитоплазму клетки хозяина, как составной элемент инфекционного процесса.
Белок теплового шока (HSP) обладает свойствами вызывать аутоиммунные реакции.
(0,2–1,5 мкм), грамотрицательные, облигатные внутриклеточные паразиты. За неспособность синтезировать собственные высокоэнергетические соединения (они развиваются за счет богатых энергией соединений клетки–хозяина) их называют иногда «энергетическими паразитами». Включают одно семейство , один род с двумя видами– Chlamydia trachomatis – возбудитель трахомы и Ch. psittaci – возбудитель орнитозов.
(Источник: «Микробиология: словарь терминов», Фирсов Н.Н., М: Дрофа, 2006 г.)
Хламидии(Источник: «Словарь терминов микробиологии»)
Смотреть что такое "хламидии" в других словарях:
Хламидии Chlamydia trachomatis Научная классификация Царство: Бактерии … Википедия
- (Chlamydiales), порядок бактерий. Кокковидные микроорганизмы (диам. 0,2 1,5 мкм) с характерным облигатно внутриклеточным способом размножения. Включают сем. (Chlamydiaсеае) с единств, родом и 2 видами (Chlamydia trachomatis и С. psittaci). X.… … Биологический энциклопедический словарь
- (Chlamydia, Ber; син. миягаванеллы) род микроорганизмов сем. Chlamydiaceae (порядок Chlamydiales), объединяющий неподвижных коккоподобных грамотрицательных внутриклеточных паразитов, окрашивающихся по Романовскому Гимзе; включает виды, вызывающие … Большой медицинский словарь
Таксономия: порядок Chlamydiales, семейство Chlamydaceae, род Chlamydia. Род представлен видами С.trachomatis, C.psittaci, C.pneumoniae.
Chlamydia trachomatis серотипов D-K является основным возбудетелем мочеполового хламидиоза.
Хламидии способны проникнуть в клетку хозяина, размножиться в ней и выжить в период перехода из клетки в околоклеточную среду. Особое значение играют иммунные процессы в развитии заболевания, вызванного хламидийной инфекцией. Новые воспаления способствуют усилению степени иммунного ответа хозяина и степени патологических повреждений.
У человека может быть обнаружена персистентная инфекция, при которой возбудитель находится в контакте с клеткой-хозяином длительное время, но не растет, что указывает на его существование в изменённом состоянии. Персистенция не всегда проявляет себя клинически.
Персистенция под влиянием внешних факторов представляет собой отклонение от характерного для хламидий цикла развития. Отклонение выражается в замедлении цикла развития, которое вызвано отличием условий окружающей среды от типичных условий, которые соблюдающихся при культивировании клеток.
Постоянное присутствие этих микроорганизмов внутри клетки-хозяина (персистенция), когда не выявляется их рост, считают главным фактором в патогенезе хламидийной инфекции.
Из-за особенностей хламидий, антибактериальные препараты против них часто не так эффективны, как против обычных бактерий, поэтому лечение хламидиоза более сложное и трудоемкое.
Болезни, вызываемые хламидиями, называют хламидиозами . Заболевания, вызываемые C. trachomatis и C. pneumoniae, - антропонозы. Орнитоз, возбудителем которого является С. psittaci, -зооантропонозная инфекция.
Морфология хламидий : мелкие, грам-отрицательные бактерии, шаровидной формы. Не образуют спор, нет жгутиков и капсулы. Клеточная стенка: 2-х слойная мембрана. Имеют гликолипиды. По Граму – красный цвет. Основной метод окраски – по Романовскому – Гимзе.
2 формы существования: элементарные тельца (неактивные инфекционные частицы, вне клетки); ретикулярные тельца (внутри клеток, вегетативная форма).
Культивирование: Можно размножать только в живых клетках. В желточном мешке развивающихся куриных эмбрионов, организме чувствительных животных и в культуре клеток
Ферментативная активность : небольшая. Ферментируют пировиноградную кислоту, синтезируют липиды. Не способны синтезировать высокоэнергетические соединения.
Антигенная структура : Антигены трех типов: родоспецифический термостабильный липополисахарид (в клеточной стенке). Выявляют с помощью РСК; видоспецифический антиген белковой природы (в наружной мембране). Обнаруживают с помощью РИФ; вариантоспецифический антиген белковой природы.
Факторы патогенности. С белками наружной мембраны хламидий связаны их адгезивные свойства. Эти адгезины обнаруживают только у элементарных телец. Хламидии образуют эндотоксин. У некоторых хламидий обнаружен белок теплового шока, способный вызывать аутоиммунные реакции.
Резистентность . Высокая к различным факторам внешней среды. Устойчивы к низким температурам, высушиванию. Чувствительны к нагреванию.
Распространенность инфекции по различным данным составляет до 60% у женщин и до 51% у мужчин, страдающих воспалительными заболеваниями мочеполовой системы.
Для хламидий характерен уникальный цикл развития: основными морфологическими формами являются элементарные тельца (ЭТ) и ретикулярные тельца (РТ). ЭТ - это зрелая форма возбудителя, адаптированная к внеклеточному существованию и нечувствительная к антибиотикам. РТ - это неинфекционная форма внутриклеточного существования, образующаяся в процессе размножения и поддающаяся действию антибиотиков.
В связи с цикличностью размножения возбудителя и его способностью длительно сохраняться в клетках, заболевание склонно к хронизации и рецидивирующему течению, полиморфизму клинических проявлений и как следствие - трудности в диагностике и лечении. Хроническая хламидийная инфекция приводит к серьезным осложнениям, таким как нарушение репродуктивной функции, анте-и интранатальное инфицирование плода, синдром Рейтера и др.
В связи со стертостью и не непатогномоничностью клинических проявлений, наряду с оценкой анамнеза и осмотром, первостепенное значение в диагностике хламидиозов принадлежит лабораторным методам.
ПЦР - диагностика хламидиоза основана на выявлении генетического материала возбудителя (определяемый фрагмент - участки последовательности гена криптической плазмиды С.trachomatis) в биологическом материале.
Достоинствами метода являются:
Возможность использования разнообразного биологического материала в
зависимости от места предполагаемой локализации возбудителя;
выявление генетического материала в малом количестве пробы;
благодаря высокой чувствительности и специфичности возможность осуществления
ранней диагностики заболеваний и выявления бессимптомных форм инфекции;
требования к забору образцов биологического материала, а также условия их
хранения и транспортировки значительно упрощены по сравнению с
бактериологическим методом, так как нет необходимости сохранять возбудителя
в живом виде;
скорость проведения анализа.